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Y染色体微缺失分子检测指南
前言

在****发生障碍引起的男性不育患者中,Y染色体微缺失的发生率仅次于Klinefelter’s syndrome(克氏综合征),是居于第二位的遗传因素。Y染色体微缺失已成为男性不育患者的常规检查项目。欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网为提高诊断质量,在1999年和2004年先后发布了第一版和第二版Y染色体微缺失分子检测指南。经过多年的临床实践证明该指南准确、灵敏和易于操作。2005年4月在上海召开了中国人Y染色体微缺失分子诊断的研讨会,会议在欧洲指南的基础上起草了符合目前我国男性不育诊疗现状,并反应最新生物技术发展的中国人Y染色体微缺失分子检测指南。

实验指南


Y染色体上存在影响****发生的无****因子(AZF)区域,进一步可分为AZFa,AZFb和AZFc三个区域。Y染色体微缺失分子检测实验利用多重聚合酶链反应(multiplex-PCR)特异性扩增Y染色体AZF区域的序列标签位点(STS),扩增产物用电泳或杂交等方法进行检测。
PCR扩增后检测方法
PCR扩增产物最常见的检测方法是琼脂糖凝胶电泳,本指南也予以推荐。由于每个泳道有5条扩增产物,若其分子量相差太小,电泳时间将延长至几个小时甚至过夜。为了提高效率,选择引物时注意各产物条带之间的长度差别是否足够大,电泳时间控制在1时以内比较合适。
PCR产物经毛细管电泳方法检测,灵敏度更高,检测更快速,更准确,易于实验自动化。期待该方法的配套试剂能够取代目前的传统检测方法。
Y染色体微缺失分子检测的临床意义
Y染色体微缺失遗传型与表型的关系已进行了大量研究,对临床有非常好的指导意义。
AZFa、AZFb和AZFc三个区域全部缺失的患者,100%表现为无****症。不可能通过任何手段从睾丸中获得****。
AZFa区域整段缺失通常导致唯支持细胞综合征(SCO综合征),临床表现为无****症。如果诊断为整段AZFa区域缺失,若想从睾丸中获得****进行ICSI已不大可能。
AZFb和AZFb+c整段缺失的典型睾丸组织学特征是SCO综合征或生精阻滞。与AZFa区域整段缺失的情况类似,这种病人在睾丸穿刺时也找不到****。因此,不推荐给这类病人施行ICSI。
AZFc缺失的临床和睾丸组织学表型多种多样。一般说来,AZFc缺失患者尚残存****生成能力。AZFc缺失见于无****症或严重少****症患者,罕见情况下,也可以在自然状态下遗传给其男性后代。在无****症患者中,AZFc缺失者通过TESE获得****的机会要大得多,也可以进行ICSI受孕。但这些患者的男性子代将是AZFc缺失的携带者。
另外,有研究发现AZFc区域缺失的少****症患者,其****数目有进行性下降的趋势,最后发展为无****症。因此,对AZFc区域缺失的少****症患者,应及早进行治疗或将其****进行冷冻保存。
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